每一个独立博客的背后,都有一颗追寻自由的心……
分类存档: Biology

Nucleotide Count V1.0 Release

做分子的同仁们注意啦,有时想知道一个特定的DNA或RNA序列长度,还要打开什么其它软件粘贴进去查看,现在不用了,把序列直接粘贴到框内,提交即可看到序列长度。 网址:http://app.shuai.be/mol/ 特点:可以去除序列中空格,回车等非...

关于酶切的一点经验

酶切反应系统包括:DNA,酶,buffer,灭菌水。 不同公司的酶和buffer系统是不同的,所以一个反应应该用同一个公司的酶和buffer(常识)。NEB和promega的酶都不错的,我们常用的酶是NEB(new england biolabs)公司生产的酶。使用前应该阅...

双酶切连接反应全攻略

双酶切连接反应之全攻略 前一阵子一直在做双酶切质粒重组,失败了 很多次,不过很快改善了 实验方法,用2周重组了 14个质粒。现就自己的体会,结合战友的宝贵经验,谈一下质粒重组的一些个人经验。 1、回收PCR产物:在进行PCR扩增时...

限制性内切酶的注意事项

限制性内切酶的注意事项 1)购买的限制性内切酶带有两种不同的酶切缓冲液,该用哪一种? 每种限制性内切酶带有一管酶的最适反应液(通常是一种4-CORE反应液),可能还带有一只MULTI-CORE反应液。 2)4-CORE酶切缓冲液体系是什么? 大多...

质粒和菌株的邮寄运送方法

基因质粒的邮寄和收获方法: EMS或挂号或其他快递公司投递。 为了安全和方便运输,建议同志们将质粒或基因等资源先点到膜上,风干后走 点膜:在滤纸(最好灭菌)上用铅笔画一直径0.2cm-0.4cm圈,将一定体积的质粒点在圈内(比如10u...

怎样查找质粒图谱

这里讲一下如何查找质粒图谱。 最好的图谱就是NCBI和公司里提供的了, 第一步去NCBI查找,一般常用质粒都有了。然后以.db格式下载,再用Invitrogen的VectorNTI打开,就能得到一张很好的质粒图。 如果找不到,就去google,(baidu上比...

DNA胶回收注意事项

胶回收DNA注意事项 ①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。所以为了减少胶的体积,我们就可以用相对比较薄的胶来跑电泳,通常只要够点样即可,或是采用薄而宽的梳子来跑胶。这样可减少回收试剂引起的一些后续...

蓝白斑筛选

  蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这...