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关于酶切的一点经验

酶切反应系统包括:DNA,酶,buffer,灭菌水。 不同公司的酶和buffer系统是不同的,所以一个反应应该用同一个公司的酶和buffer(常识)。NEB和promega的酶都不错的,我们常用的酶是NEB(new england biolabs)公司生产的酶。使用前应该阅...

双酶切连接反应全攻略

双酶切连接反应之全攻略 前一阵子一直在做双酶切质粒重组,失败了 很多次,不过很快改善了 实验方法,用2周重组了 14个质粒。现就自己的体会,结合战友的宝贵经验,谈一下质粒重组的一些个人经验。 1、回收PCR产物:在进行PCR扩增时...

限制性内切酶的注意事项

限制性内切酶的注意事项 1)购买的限制性内切酶带有两种不同的酶切缓冲液,该用哪一种? 每种限制性内切酶带有一管酶的最适反应液(通常是一种4-CORE反应液),可能还带有一只MULTI-CORE反应液。 2)4-CORE酶切缓冲液体系是什么? 大多...