酶切反应系统包括：DNA，酶，buffer，灭菌水。

不同公司的酶和buffer系统是不同的，所以一个反应应该用同一个公司的酶和buffer(常识)。NEB和promega的酶都不错的，我们常用的酶是NEB(new england biolabs)公司生产的酶。使用前应该阅读NEB公司的产品目录和该酶的使用说明。下面分几个方面简要说明：

双酶切连接反应之全攻略
前一阵子一直在做双酶切质粒重组，失败了 很多次，不过很快改善了 实验方法，用2周重组了 14个质粒。现就自己的体会，结合战友的宝贵经验，谈一下质粒重组的一些个人经验。

限制性内切酶的注意事项

1)购买的限制性内切酶带有两种不同的酶切缓冲液，该用哪一种？
每种限制性内切酶带有一管酶的最适反应液（通常是一种4-CORE反应液），可能还带有一只MULTI-CORE反应液。

2)4-CORE酶切缓冲液体系是什么？
大多数（大约75%）Promega公司的限制性内切酶有一种最适酶切缓冲液，即4-CORE酶切缓冲液，分别叫作A、B、C和D。其余的25%的限制性内切酶带有一种特定的酶切缓冲液（酶切缓冲液E-L）。每一种限制性内切酶带有一只最适酶切缓冲液。

基因质粒的邮寄和收获方法：

EMS或挂号或其他快递公司投递。

为了安全和方便运输，建议同志们将质粒或基因等资源先点到膜上，风干后走

这里讲一下如何查找质粒图谱。

最好的图谱就是NCBI和公司里提供的了，

第一步去NCBI查找，一般常用质粒都有了。然后以.db格式下载，再用Invitrogen的VectorNTI打开，就能得到一张很好的质粒图。

胶回收DNA注意事项

这几个的区别呢
经常会听到有人讨论

连一些PHPER面试都会出这个题目

我浅显的说一下我的意见

如何让php显示本地时间2007-09-10 07:53许多编程的朋友在使用php中的date（）函数时，显示出来的时间都与本地时间不一样。那是因为PHP5默认为格林威治时间，与北京时间相差8个小时。在php.ini中，将“;date.timezone =”，改成“date.timezone = PRC”，重启WEB服务。或在date（）函数前加上date_default_timezone_set('PRC');语句。

PHP中其它与时间相关的函数: